«جوکر۲؛ طبقه بیست و یک» با تغییرات جذابی شروع شده. میزبان این سری برنامه جوکر، کسی نیست جز احسان علیخانی که پشت میزی پر از امکانات جدید نشسته و شرکت کننده ها رو در دکور بزرگ تر و مدرن تر این سری از جوکر زیر نظر داره. دکور جوکر ٢ کلی جاهای مخفی داره که البته برای احسان علیخانی چندان مخفی نیست و خودش با استفاده از اون ها بازیگرها رو درگیر چالش هایی می کنه که نخندیدن براشون خیلی سخت میشه و در ٦ ساعت بازی، زیاد فرصتی برای نفس راحت کشیدن ندارن. البته چیزی که قرار نیست هیچکس یادش بره اینه که بقیه رو بخندون اما خودت نخند.

در این قسمت ناهید مسلمی شرکت کننده ها رو به یه سفر دریایی می بره، رویا میرعلمی چندتا تست بازیگری می گیره، آخرین کارت زرد هم داده میشه و میزبان با یک خبر عجیب همه رو شوکه می کنه ...

تو این قسمت اولین خواستگار نعیمه میاد، ناهید مسلمی دزد دریایی میشه و تعدادی ماشین میرن عیادت یک پیکان رو به موت!

فینال با ورود هشت شرکت کننده در حالی شروع میشه که نعیمه با تغییر رفتاری بزرگش، رویا با جوک گفتن های بی سر و تهش و ناهید با روش های مخصوص به خودش سعی می کنن بقیه رو بخندونن اما اوج ماجرا اونجاییه که گیتی یه گروه سرود نوستالژیک تشکیل میده و رکورد کارت زرد جوکر رو می زنه!